PCR定義PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是指在DNA聚合酶催化下，以母鏈DNA為模板，以特定引物為延伸起點(diǎn)，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復(fù)制出與母鏈模板DNA互補(bǔ)的子鏈DNA的過程。是一項(xiàng)DNA體外合成放大技術(shù)，能快速特異地在體外擴(kuò)增任何目的DNA。可用于基.....

PCR相關(guān)技術(shù)
一.錨定PCR(anchored PCR)：
?引進(jìn)錨定引物，可以幫助克服序列未知或序列未全知的障礙。
?在DNA3’-末端加上poly(dG)尾，與此相對應(yīng)的錨定引物poly(dC)一般應(yīng)在十二聚以上。

二.不對稱PCR(asymmetric PCR)
不對稱PCR主要是在PCR體系中設(shè)計不同的引物濃度，兩條引物濃度比為1：50或1：100，前12個循環(huán)兩條模板等量擴(kuò)增，之后低濃度引物消耗殆盡，其擴(kuò)增產(chǎn)物減少以至于無；而高濃度引物介導(dǎo)產(chǎn)生的擴(kuò)增產(chǎn)物（即單鏈DNA）逐漸增加，可得到大量單鏈DNA（ssDNA）用于直接測序。
三.反向PCR(inverse PCR)

四.多重PCR(multiplex PCR)
多重PCR是用多對引物同時對模板DNA上的多個區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增。
多重PCR技術(shù)的難點(diǎn)不是在于其原理和操作的復(fù)雜性，而是在于其多對引物的設(shè)計，必需保證多對引物之間不形成引物二聚體，引物與目標(biāo)模板區(qū)域具有高度特異性。
應(yīng)用于基因診斷，對與**相關(guān)的基因（龐大）進(jìn)行擴(kuò)增檢測。

五.逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)
?由mRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cDNA鏈作為PCR反應(yīng)模板。
?逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA時，引物可選用特異引物、隨機(jī)六聚體引物或寡聚dT(12-18)。
?設(shè)計RT-PCR的引物時*好是分散在不同的外顯子上，以免基因組DNA的污染導(dǎo)致假陽性結(jié)果